在比較僅測量一個參數(shù)或受益于使用 SFR vario 進行在線多傳感器監(jiān)測的釀酒酵母培養(yǎng)物的結(jié)果時,多參數(shù)方法勝出。它表明,在不同的培養(yǎng)階段,不同的傳感器提供最佳結(jié)果,從而可以在不同的培養(yǎng)階段獲得可靠的整體圖像和最確鑿的信息。
SFR vario 可監(jiān)測多個獨立測量的參數(shù),例如氧氣、pH 值、CO2、生物質(zhì)和 OUR,并提供全貌。這些信號可以相互驗證,以獲得更高的生物過程安全性以及更可靠和可重復(fù)的生產(chǎn)。它為整個文化時期提供了不間斷的結(jié)論性信息。這使其成為搖瓶規(guī)模工藝開發(fā)的理想工具。該產(chǎn)品靈活、可擴展,并使用無線技術(shù)進行連接。蘇黎世應(yīng)用科學(xué)大學(xué)的研究人員進行的基礎(chǔ)研究*是對釀酒酵母培養(yǎng)物進行的,但監(jiān)測微生物培養(yǎng)物的多參數(shù)方法的原理也可以應(yīng)用于其他培養(yǎng)物。
生物質(zhì),O2和大腸桿菌生長過程中的pH監(jiān)測
大腸桿菌K12在含有葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基中顯示出明顯的雙氧生長,可以用SFR變量監(jiān)測。測量被停止數(shù)次以進行離線采樣 - 以確定底物濃度 - 顯示在圖表中的間隙中。在第一個生長期,葡萄糖被消耗(1)。該系統(tǒng)在較低的生物量范圍內(nèi)顯示出較低的精度,但隨著細胞密度的增加而改善。雖然細菌產(chǎn)生的乙酸降低了培養(yǎng)基的pH值,但氧濃度的強烈降低到10%a.s.表明高代謝活性。當(dāng)葡萄糖濃度降至0.1g L以下時-1大約6小時后(離線測定,此處未顯示數(shù)據(jù))生長停止,氧氣水平迅速上升。這也顯示在在線測量的生物量曲線(2)中的小平臺(放大插入)中。在這個階段,細菌將其新陳代謝調(diào)整為乳糖。只有通過新的在線監(jiān)測系統(tǒng)才能在停止氧氣消耗和生長的情況下記錄這種精確匹配。在第三階段,大腸桿菌在乳糖上生長,直到被消耗并且培養(yǎng)物變成固定期(3)。
復(fù)雜培養(yǎng)基中的酵母生長階段
K. marxianus在以葡萄糖為底物的搖瓶中培養(yǎng)時顯示出兩個生長階段。在第一階段,葡萄糖在需氧條件下代謝(1),氧含量持續(xù)降低到5%以下。由于代謝產(chǎn)物,pH值從7降低到6.1。培養(yǎng)9小時后,葡萄糖全部消耗(離線測定,此處未顯示數(shù)據(jù)),pH再次升高。在第二期 - 氧氣有限 - 階段K. marxianus表現(xiàn)出顯著的生長速度,這可以在散射光(=生物質(zhì))測量中清楚地觀察到(2),同時在高需氧量下代謝第一階段產(chǎn)生的葡萄糖產(chǎn)物。使用SFR變量同時監(jiān)測氧氣、pH和生物量為培養(yǎng)監(jiān)測和代謝過程評估提供了全新的可能性。
復(fù)雜培養(yǎng)基中的酵母生長階段
K. marxianus在以葡萄糖為底物的搖瓶中培養(yǎng)時顯示出兩個生長階段。在第一階段,葡萄糖在需氧條件下代謝(1),氧含量持續(xù)降低到5%以下。由于代謝產(chǎn)物,pH值從7降低到6.1。培養(yǎng)9小時后,葡萄糖全部消耗(離線測定,此處未顯示數(shù)據(jù)),pH再次升高。在第二期 - 氧氣有限 - 階段K. marxianus表現(xiàn)出顯著的生長速度,這可以在散射光(=生物質(zhì))測量中清楚地觀察到(2),同時在高需氧量下代謝第一階段產(chǎn)生的葡萄糖產(chǎn)物。使用SFR變量同時監(jiān)測氧氣、pH和生物量為培養(yǎng)監(jiān)測和代謝過程評估提供了全新的可能性。